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🔬CH 03Biochimie analytique🏥 ST2S · Physique-Chimie pour la Santé

Analyses médicales

Spectrophotométrie UV-visible (loi de Beer-Lambert A=εlc), courbe d'étalonnage, dosage colorimétrique, chromatographie (CCM, HPLC), électrophorèse.

📊 Spectrophotométrie médicale
Loi de Beer-Lambert
Théorème
A = ε × l × c A = absorbance (sans unité, 0 ≤ A ≤ 2 en pratique) ε = coefficient d'absorption molaire (L·mol⁻¹·cm⁻¹) — spécifique au soluté et à λ l = longueur du trajet optique dans la cuve (cm) c = concentration molaire (mol/L) ABSORBANCE : A = log(I₀/I) = −log(T) T = I/I₀ = transmittance (0 à 1) DOMAINE DE VALIDITÉ : • Solutions diluées (c < 0,01 mol/L) • Lumière monochromatique (λ fixée) • Pas d'association ou décomposition du soluté APPLICATIONS MÉDICALES : • Dosage glycémie, créatinine, bilirubine • Numération des globules rouges • Dosage de l'hémoglobine glyquée (HbA1c)
Travailler à λ_max (maximum d'absorption) pour une meilleure sensibilité et une meilleure linéarité de la réponse.
Courbe d'étalonnage — protocole
Méthode
MÉTHODE DE DOSAGE : 1. Préparer des solutions étalon c₁, c₂, c₃… (concentrations connues) 2. Mesurer A₁, A₂, A₃… pour chaque étalon à λ_max 3. Tracer A = f(c) → droite de pente (ε×l) 4. Mesurer A_inconnue de la solution à doser 5. Lire c_inconnue sur la droite (ou calculer c = A/(ε×l)) DROITE D'ÉTALONNAGE : A = ε × l × c (passe par l'origine) Pente = ε × l CRITÈRES DE QUALITÉ : • Coefficient de détermination R² ≥ 0,999 • Solution inconnue doit être dans la gamme d'étalonnage • Blanc (solvant pur) mesuré en premier
Exercices
EX-AN1FacileBeer-Lambert — calcul de concentration

Glucose : ε=720L·mol⁻¹·cm⁻¹, l=1cm, A=0,36. Calculer c.

🧮 Résoudre avec IA
EX-AN2IntermédiaireDosage de l'hémoglobine

Hémoglobine : ε=70000L·mol⁻¹·cm⁻¹, l=1cm, A=0,56. Concentration en g/L si M(Hb)=64500g/mol ?

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